聯(lián)系我們
高脂喂養(yǎng)8周快速造模！ApoE-KO小鼠助力心血管藥物研發(fā)突破
動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）是一種慢性進(jìn)行性血管病變，以動脈壁脂質(zhì)沉積、炎癥反應(yīng)和斑塊形成為主要特征。隨著病程進(jìn)展，動脈壁逐漸增厚、硬化導(dǎo)致管腔狹窄，引發(fā)多器官缺血性病變，臨床表現(xiàn)為心絞痛、心肌梗死、腦卒中及下肢間歇性跛行等，常與高血壓、糖尿病等代謝性疾病互相影響，形成惡性循環(huán)。AS因其發(fā)病隱匿和高危性，常被稱為“血管系統(tǒng)的不定時炸彈”。
AS的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及脂質(zhì)代謝異常、炎癥反應(yīng)、內(nèi)皮功能障礙等多因素相互作用，目前尚未完全闡明其具體調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。在基礎(chǔ)研究中，盡管嚙齒類動物（尤其是大小鼠）模型存在物種局限性，但其可控的遺傳背景和可誘導(dǎo)的AS病理特征，仍使其成為探索AS發(fā)病機(jī)制及藥物干預(yù)策略的首選模型體系。
動脈粥樣硬化研究模型推薦——Apoe基因敲除小鼠
載脂蛋白E（Apolipoprotein E, ApoE）是脂質(zhì)代謝的核心調(diào)控蛋白，其主要功能包括介導(dǎo)脂蛋白、膽固醇的轉(zhuǎn)運及脂溶性維生素代謝。在外周組織中，ApoE主要由肝臟和巨噬細(xì)胞合成，通過調(diào)控低密度脂蛋白受體（LDLR）介導(dǎo)的脂蛋白攝取，維持膽固醇穩(wěn)態(tài)；在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)，則由星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌，通過特異性受體介導(dǎo)膽固醇向神經(jīng)元定向轉(zhuǎn)運。研究表明，ApoE通過多種機(jī)制發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用：促進(jìn)乳糜微粒（CM）和極低密度脂蛋白（VLDL）的清除、調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能、參與膽固醇逆向轉(zhuǎn)運、減輕炎癥反應(yīng)等。因此，Apoe是防治動脈粥樣硬化性血管疾病的重要靶點。
斯萊克景達(dá)采用基因編輯技術(shù)在C57BL/6J背景上成功構(gòu)建了Apoe基因敲除（ApoE?/?）小鼠。該小鼠品系A(chǔ)poE蛋白功能受損，純合突變小鼠在正常飲食下即表現(xiàn)出顯著的高膽固醇血癥，在高脂飲食誘導(dǎo)下可加快動脈粥樣硬化進(jìn)程，縮短模型構(gòu)建周期，是研究動脈粥樣硬化等心血管疾病的理想模型。
模型特征
■ 脂質(zhì)代謝異常：ApoE−/−小鼠在普通飼料喂養(yǎng)下即出現(xiàn)嚴(yán)重的高膽固醇血癥，其原因是Apoe敲除后造成了肝臟對脂蛋白的攝取能力下降，其中的CM和VLDL殘粒蓄積在血中，而膽固醇主要富集于VLDL中，所以總膽固醇水平較正常小鼠升高數(shù)倍。
■ 動脈粥樣硬化病變：ApoE−/−小鼠通常在6月齡以上會自發(fā)形成動脈粥樣硬化，早期（3月齡）在主動脈根部出現(xiàn)脂質(zhì)條紋，繼續(xù)發(fā)展表現(xiàn)為主動脈弓、頭臂干動脈及其分支出現(xiàn)纖維帽包裹的壞死核心，伴膠原沉積和鈣化灶。高脂飲食可顯著提升血漿總膽固醇水平，加速動脈粥樣硬化發(fā)展，促進(jìn)膽固醇結(jié)晶、壞死灶礦化及鈣鹽沉積的形成。
研究案例
藥物（海藻糖釋放納米凝膠）抗動脈粥樣硬化效果的體內(nèi)評估：
在ApoE−/−小鼠高脂飲食（HFD）12周所誘導(dǎo)的動脈粥樣硬化模型中，實驗1組和2組每隔三天分別靜脈注射一次海藻糖釋放納米凝膠（TNG）和游離海藻糖（Trehalose），持續(xù)4周。
以下是部分實驗結(jié)果圖，從A圖可以看出對照組小鼠主動脈上脂質(zhì)沉積范圍廣、程度重，出現(xiàn)大片融合性斑塊；從C圖可以看出對照組小鼠主動脈內(nèi)膜增厚，大量脂滴聚集，血管腔因內(nèi)膜增生而狹窄；從E、G圖可以看出對照組小鼠主動脈免疫熒光圖中熒光強(qiáng)烈，表明主動脈內(nèi)膜組織的自噬功能受到損傷，已出現(xiàn)動脈粥樣硬化病變。
海藻糖釋放納米凝膠抗動脈粥樣硬化效果評估[1]
ApoE−/−小鼠常見問題解析
ApoE−/−小鼠高脂飼料喂養(yǎng)多長時間，可誘導(dǎo)出動脈粥樣硬化斑塊？
在Apoe基因敲除小鼠動脈粥樣硬化模型的構(gòu)建過程中，飼料的配方設(shè)計（包括脂肪含量、膽固醇含量以及是否添加膽酸鈉）對疾病的發(fā)生發(fā)展具有重要影響。
西方飲食D12079B（Research Diets）膽固醇含量為0.15%，造模周期約16周，適用于研究動脈粥樣硬化長期演變過程。D12108C和D12109C膽固醇含量均為1.25%，但D12109C額外添加了膽酸鈉，其主要通過膽汁酸循環(huán)增強(qiáng)膽固醇合成，顯著提升血管壁炎癥反應(yīng)，加速動脈粥樣硬化的發(fā)展。
D12108C造模周期約為12周，其高膽固醇負(fù)荷可在較短周期內(nèi)形成中等程度的斑塊，適合研究斑塊動態(tài)形成機(jī)制及早期干預(yù)。D12109C造模周期約為8周，更易誘發(fā)炎癥反應(yīng)和肝毒性，可以更好地研究炎癥微環(huán)境對動脈粥樣硬化的影響。另外需注意，造模除了飼料，也會受到飼養(yǎng)條件等影響。
更多模型詳細(xì)信息及相關(guān)問題咨詢，
歡迎隨時與我們?nèi)〉寐?lián)系，
我們將為您提供專業(yè)解答與支持。
參考文獻(xiàn)：
[1] Zhong Y,Maruf A, Qu K, et al. Nanogels with covalently bound and releasable trehalose for autophagy stimulation in atherosclerosis.J Nanobiotechnology. 2023 Dec 8;21(1):472.
[2] Fang Y, Su H, Yin X, et al. Trehalose attenuates atherosclerosis via autophagy-dependent cholesterol efflux in ApoE-/- mice. J Transl Med 2022, 20(1): 219.
[3] Wang B, Bennett M. Aging and atherosclerosis: mechanisms, functional consequences, and potential therapeutics. Adv Drug Deliv Rev 2023, 196: 114-133.
[4] Hubbard B K, Calkin A C, Drew B G. Apolipoprotein E and atherosclerosis: from lipids to inflammation. J Clin Med 2021, 10(18): 4212.
實驗動物訂購電話: 0731-84877202/84877208
廣東專線: 400-881-9598
技術(shù)服務(wù)熱線: 0731-84876042
企業(yè)QQ: 800073177
郵箱: hnslkjd@163.com
地址: 湖南省長沙市芙蓉區(qū)隆平產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)豪丹科技園3棟3樓
關(guān)注我們
